REZUMAT ŞI EXPLICAŢIE TESTUL
Malaria este o boală hemolitică, febrilă, transmisă de țânțari, care infectează peste 200 de milioane de oameni și ucide mai mult de 1 milion de oameni pe an.Este cauzată de patru specii de Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale și P. malariae.Aceste plasmodii infectează și distrug toate eritrocitele umane, producând frisoane, febră, anemie și splenomegalie.P. falciparum cauzează boli mai severe decât celelalte specii plasmodiale și cauzează majoritatea deceselor cauzate de malarie.P. falciparum și P. vivax sunt cei mai comuni agenți patogeni, cu toate acestea, există o variație geografică considerabilă în distribuția speciilor.
În mod tradițional, malaria este diagnosticată prin demonstrarea organismelor pe frotiuri groase de sânge periferic colorate cu Giemsa, iar diferitele specii de plasmodium se disting prin apariția lor în eritrocitele infectate1.Tehnica este capabilă de diagnosticare precisă și fiabilă, dar numai atunci când este efectuată de microscopiști calificați folosind protocoale definite2, ceea ce prezintă obstacole majore pentru zonele îndepărtate și sărace ale lumii.
Kitul de testare rapidă Malaria Pf / Pan Antigen este dezvoltat pentru a rezolva aceste obstacole.Testul folosește o pereche de anticorpi monoclonali și policlonali la proteina specifică P. falciparum, Histidine Repeat Protein II (pHRP-II) și o pereche de anticorpi monoclonali la plasmodium Lactate Dehydrogenase (pLDH), o proteină produsă de cele patru specii de plasmodium, permițând astfel detectarea și diferențierea simultană a oricăror alte trei plasmodium falcipa in.Poate fi efectuată de personal neinstruit sau minim calificat, fără echipament de laborator.
PRINCIPIU
Kitul Pf/Pan Malaria Rapid Test este un imunotest cromatografic cu flux lateral.Componentele benzilor de testare constau din: 1) un tampon de conjugat de culoare visiniu care contine anticorp anti-PHRP-II de șoarece conjugat cu aur coloid (conjugați pHRP II-aur) și anticorp anti-pLDH de șoarece conjugat cu aur coloid (conjugați pLDH-aur);
2) o bandă cu membrană de nitroceluloză care conține două benzi de testare (benzi Pan și Pv) și o bandă de control (bandă C).Banda Pan este pre-acoperită cu anticorp monoclonal anti-pLDH prin care poate fi detectată infecția cu oricare dintre cele patru specii de plasmodi, banda Pf este pre-acoperită cu anticorpi policlonali anti-pHRP-II pentru detectarea infecției cu Pf, iar banda C este acoperită cu IgG de capră anti-șoarece.
În timpul testului, un volum adecvat de eșantion de sânge este distribuit în godeul de probă (S) al casetei de testare, se adaugă un tampon de liză în godeul tampon (B).Tamponul conține un detergent care lizează globulele roșii din sânge și eliberează diverși antigene plasmodium, care migrează prin acțiune capilară pe banda deținută în casetă.pHRP-II, dacă este prezent în eșantion, se va lega de conjugații pHRP II-aur.Imunocomplexul este apoi captat pe membrană de anticorpii anti-pHRPII pre-acoperiți, formând o bandă Pf de culoare visiniu, indicând un rezultat pozitiv al testului Pf.pLDH dacă este prezent în specimen se va lega de conjugatele de aur pLDH.Imunocomplexul este apoi captat pe membrană de anticorpul anti-pLDH pre-acoperit, formând o bandă Pan de culoare visiniu, indicând un rezultat pozitiv al testului cu plasmodium.În absența benzii Pan, poate fi recomandat un rezultat pozitiv al testului pentru oricare dintre celelalte trei plasmodii.
Absența oricăror benzi de testare (Pan și Pf) sugerează un rezultat negativ.Testul conține un control intern (bandă C) care ar trebui să prezinte o bandă de culoare visiniu a imunocomplexului de IgG anti-șoarece de capră / IgG de șoarece (conjugate pHRP-II și pLDH-aur), indiferent de dezvoltarea culorii pe oricare dintre benzile de testare.În caz contrar, rezultatul testului este invalid și specimenul trebuie retestat cu un alt dispozitiv.
