REZUMAT ŞI EXPLICAŢIE TESTUL
Leishmanioza viscerală, sau Kala-azar, este o infecție diseminată cauzată de mai multe subspecii ale L. donovani.Organizația Mondială a Sănătății (OMS) estimează că boala afectează aproximativ 12 milioane de oameni din 88 de țări.Se transmite oamenilor prin mușcături de flebotomus, care se infectează prin hrănirea animalelor infectate.Deși este o boală întâlnită în țările sărace, în sudul Europei, a devenit principala infecție oportunistă la pacienții cu SIDA.Identificarea organismului L. donovani din sânge, măduvă osoasă, ficat, ganglioni limfatici sau splină oferă un mijloc cert de diagnostic.Detectarea serologică a anti-L.IgM donovani se dovedește a fi un marker excelent pentru leishmanioza viscerală acută.Testele utilizate în clinică includ ELISA, anticorpi fluorescenți sau testele de aglutinare directă 4-5.Recent, utilizarea proteinei specifice L. donovani în test a îmbunătățit în mod dramatic sensibilitatea și specificitatea.
Testul rapid combinat Leishmania IgG/IgM este un test serologic bazat pe proteine recombinate, care detectează simultan anticorpii IgG și IgM la L. Donovani.Testul oferă un rezultat fiabil în 15 minute fără instrumente.
PRINCIPIU
Testul rapid Leishmania IgG/IgM este un test imunocromatografic cu flux lateral.Caseta de testare constă din: 1) un tampon de conjugat de culoare visiniu care conține antigen recombinant L. donovani conjugat cu aur coloid (conjugați Leishmania) și conjugați IgG-aur de iepure, 2) o bandă de membrană de nitroceluloză care conține două benzi de testare (benzi T1 și T2) și o bandă de control (banda C).Banda T1 este pre-acoperită cu IgM monoclonal anti-uman pentru detectarea anti-L.Banda donovani IgM, T2 este preacoperită cu reactivi pentru detectarea anti-L.donovani IgG, iar banda C este preacoperită cu IgG de capră anti iepure.
Când un volum adecvat de eșantion de testat este distribuit în godeul de probă al casetei, specimenul migrează prin acțiune capilară peste casetă.IgM L. donovani dacă este prezent în specimen se va lega de conjugații Leishmania.Imunocomplexul este apoi captat pe membrană de anticorpul anti-IgM uman pre-acoperit, formând o bandă T1 de culoare visiniu, indicând un rezultat pozitiv al testului IgM L. donovani.IgG de L. donovani, dacă este prezent în specimen, se va lega de conjugații Leishmania.Imunocomplexul este apoi captat de reactivii pre-acoperiți de pe membrană, formând o bandă T2 de culoare visiniu, indicând un rezultat pozitiv al testului IgG L. donovani.
Absența oricăror benzi T (T1 și T2) sugerează un rezultat negativ.Testul conține un control intern (bandă C) care ar trebui să prezinte o bandă de culoare visiniu a imunocomplexului de conjugat de capră anti IgG de iepure/IgG de iepure-aur, indiferent de dezvoltarea culorii pe oricare dintre benzile T.În caz contrar, rezultatul testului este invalid și specimenul trebuie retestat cu un alt dispozitiv.
